1. 目的基因的获取
抗虫棉的毒蛋白基因源自“苏云金芽孢杆菌”的Bt毒蛋白基因。提取该基因的方法包括人工合成或直接从自然界中获取。
2. 基因表达载体的构建
构建基因表达载体时,使用同种限制性核酸内切酶处理Bt毒蛋白基因和质粒(或其他运载体)。在载体中,除了目的基因,还需包含标记基因、启动子和终止子。
3. 受体细胞的导入
将目的基因导入棉花细胞,常用的方法是农杆菌转化法,因为棉花是双子叶植物,这种方法最为便捷。
4. 目的基因的表达与检测
通过植物组织培养技术,如选修三中的细胞工程或选修一中的菊花组织培养,培养含有目的基因的植物细胞。待植物生长至一定阶段,可将棉铃虫放置其上,观察一段时间以检测其抗虫效果。