法律分析：分居协议夫妻之间是否必须分居：签订了分居协议，只要内容真实合法，就是有效的，如果协议有约定必须分居，那么夫妻之间应当按照协议的内容履行分居的约定，如果不履行的，夫妻分居事实不存在，不能以分居为理由向人民法院提起诉讼离婚。

法律依据：《中华人民共和国民法典》 第一千零五十一条 有下列情形之一的，婚姻无效：(一)重婚二)有禁止结婚的亲属关系三)未到法定婚龄。