高中生物三种离心方法是差速离心法、速度区带离心法和等密度离心法。
1、差速离心法。
差速离心法是交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。差速离心法是利用样品中各种组分的沉降系数不同而进行分离的方法,又称差分离心或差级离心。
使用离心法时,大分子沉降速度的量度,等于每单位离心场的速度。或s=v/ω2r。s是沉降系数,ω是离心转子的角速度(弧度/秒),r是到旋转中心的距离,v是沉降速度。沉降系数以每单位重力的沉降时间表示,并且通常为1—200×10—13秒范围,10—13这个因子叫做沉降单位S。
2、速度区带离心法。
速率区带离心法是根据样品中不同组分粒子所具有的不同的体积尺寸大小和不同的沉降系数将混合样品进行离心分离提纯。离心结束后,混合样品中不同的组分将在梯度液柱的不同位置分别形成各自的区带,然后将区带取出。
这样只需通过一次离心就可以把混合样品中的各组分分离提纯,其纯度和回收率都可以达到100%。
3、等密度离心法。
当不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上(即等密度点)形成区带,称为等密度离心法。等密度离心的有效分离取决于颗粒的浮力密度差,密度差越大,分离效果越好,与颗粒的大小和形状无关。
但后两者决定着达到平衡的速率、时间和区带的宽度。颗粒的浮力密度不是恒定不变的,还与其原来密度、水化程度及梯度溶质的同透性或溶质与颗粒的结合等因素有关。
这种技术根据浮力密度的不同分离物质。其分辨率受颗粒性质(密度、均一性、含量)、梯度性质(形状、粘度、斜率)转子类型、离心速率和时间的影响。